欧美精品v国产精品v日韩精品,7777久久亚洲中文字幕,人妻精品久久久久中文字幕,豆国产97在线 | 亚洲

產品列表PRODUCTS LIST

首頁 > 技術與支持 > PCR反應DNA 復制過程解讀
PCR反應DNA 復制過程解讀
點擊次數:93 更新時間:2025-01-21

       PCR全稱多聚酶鏈式反應(polymerase chain reaction),是一種非常強大的技術,可以通過一種非常簡單但是高效的方法來復制DNA,它可看作是生物體外的特殊DNA復制,PCR的最大特點是能將微量的DNA大幅增加。
復制DNA必要性:
DNA復制是很多研究的基礎,例如,當我們對RNA進行測序時,必須先將RNA轉化為DNA,并進行大量復制。在對于某個人進行基因組測序時,我們不能對于某個細胞或者單個分子進行測序。測序的基礎要求擁有大量的相同的DNA分子拷貝,因此,DNA復制是做生物研究中的基礎工具。那么怎么獲取這么多拷貝呢?PCR正是一個復印機一般的存在,利用DNA的幾個特性,成為批量復制DNA的方法。

PCR原理及步驟:
說到原理,我們就要回顧一下DNA結構:

DNA分子兩條單鏈以雙螺旋結構結成,DNA兩條鏈擁有自行粘附的特性,A與T配對,C與G配對,DNA粘附特性是PCR的核心原理。同時DNA復制時也是具有方向性的,DNA序列的開始端稱為5‘端,末端稱為3’端。
在復制時,需要加入一種叫做引物(primers)的東西??梢詫⒁锢斫鉃橐粋€短序列,下圖中紅色的部分就是引物。引物通常15到20個堿基,可以短一些,也可以長一些。但是必須和我們想合成的DNA片段成互補關系。將引物與DNA鏈混合時,會自動粘在上面,因為他們是互補的。引物獲得可以從公司訂購,后續(xù)有機會我們也會分享引物設計方法。

PCR過程分三步:
變性--退火--延伸,PCR中會對這三步循環(huán)播放。
A. 變性

在開始準備變性的過程中,要慢慢加熱混合物,加熱混合物時,兩條鏈間氫鍵會融化,DNA兩股鏈會分開,就像上圖粉色的部分。如果混合物熱的情況下,引物不會和DNA黏在一起,兩條DNA鏈也不會黏在一起。
B. 退火
接下來混合物慢慢的冷卻,這時引物會黏在DNA上,因為引物較小,更容易漂浮起來,和DNA結合。溫度控制在54攝氏度左右可以保證引物序列和DNA互補配對,而DNA雙鏈不會黏在一起。
C. 延伸
這一步我們需要一個幫助DNA復制的工具,即聚合酶鏈式反應中的聚合酶(polymerase)。下圖中綠色的圖形就代表著DNA聚合酶,所到之處萬物生,這也是我們身體各個細胞中用來復制DNA的工具。聚合酶的作用方式也非常生猛,直接找到部分單鏈,部分雙鏈的地方,咬住那里的序列開始進行復制。也就是說聚合酶會先找到引物,開始沿著引物進行缺失的序列填充。如下圖中看到的,在一輪填充序列后,引物所在的鏈條(橙色鏈)會被補齊。這一步中會加入As, Cs, Gs和Ts這些DNA原材料,這樣可以把他們整合到新的與模板DNA 鏈互補的半保留復制鏈。這一步的溫度稍微高一些,大概是72攝氏度。最初我們加入的是雙鏈DNA,在一個周期后,我們會獲得四條鏈,兩個周期后獲得8條鏈,30個周期后,會獲得10億條DNA鏈。

DNA 復制所需的基本要素:
       DNA 的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈 DNA 在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈,在 DNA 聚合酶的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子拷貝。在實驗中發(fā)現,DNA 在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制 DNA 的變性和復性,加入設計引物,DNA 聚合酶,dNTP 就可以完成特定基因的體外復制,這是 PCR 的理論基礎。PCR 反應是在體外模擬 DNA 的復制過程,因此反應體系中必須具有 DNA 復制所需的基本要素:
1、模板(template),含有需要擴增的 DNA 片段。
2、引物(primer),一對引物決定了需要擴增的起始和終止位置。
3、聚合酶(polymerase ),DNA 聚合酶復制需要擴增的區(qū)域。
4、脫氧核苷三磷酸(dNTP),用于構造新的互補鏈。
5、緩沖液(buffer),提供適合聚合酶行使功能的化學環(huán)境。


国精产品一区二区三区有限公司 | 久久精品国产亚洲av香蕉高清 | 欧美熟妇vivoe精品| chinese熟女老女人hd| 我在做饭他在下添好爽好硬| 天天躁日日躁狠狠躁欧美老妇小说| 边亲边脱边捏胸视频| 亚洲av永久无码精品天堂d2| 亲爱的老师4韩剧免费观看| 夫妇当面交换作爱| yy111111少妇无码理论片| 丰满熟女人妻大乳波多野吉衣| 日本免费无码一区二区到五区 | 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 美女学校丰满毛片免费看爽| 护士张开腿被奷日出白浆| 亚亚洲精品黑人巨大在线播放 | 久久精品国产亚洲av麻豆蜜芽| 国产草草影院ccyycom| 亚洲av无码一区二区乱子伦| 中老年妇女的性色视频| 校花醉酒后被乞丐进入| 欧美性潮喷xxxxx免费视频看 | 香港曰本韩国三级网站| 国产偷国产偷亚洲高清app| 亚洲清清爽爽aabb| 国产精品情侣呻吟对白视频| 天天躁日日躁狠狠躁av麻豆| 欧美肥胖老妇做爰| 美女张开腿黄网站免费| 欧美黑人xxxx高潮猛交| 亲嘴揉胸口激烈视频| 最近中文字幕大全在线看| 国产色情一区二区视频| 被猛男伦流澡到高潮h| 亚洲色成人网站www永久四虎| 日本人妻巨大乳挤奶水app| 国产毛多女人视频| 国产精品天天看天天做夜夜爽| 国产女爽爽精品视频天美传媒| 久久人人添人人爽添人人片牛牛|